Mostrar el registro sencillo del ítem
dc.contributor.author
Hugo, Martín
dc.contributor.author
Martínez, Alejandra
dc.contributor.author
Trujillo, Madia
dc.contributor.author
Estrada, Damián
dc.contributor.author
Mastrogiovanni, Mauricio
dc.contributor.author
Linares, Edlaine
dc.contributor.author
Augusto, Ohara
dc.contributor.author
Issoglio, Federico Matías
dc.contributor.author
Zeida Camacho, Ari Fernando
dc.contributor.author
Estrin, Dario Ariel
dc.contributor.author
Heijnen, Harry F. G.
dc.contributor.author
Piacenza, Lucía
dc.contributor.author
Radi, Rafael
dc.date.available
2018-11-26T19:14:51Z
dc.date.issued
2017-02
dc.identifier.citation
Hugo, Martín; Martínez, Alejandra; Trujillo, Madia; Estrada, Damián; Mastrogiovanni, Mauricio; et al.; Kinetics, subcellular localization, and contribution to parasite virulence of a Trypanosoma cruzi hybrid type A heme peroxidase (TcAPx-CcP); National Academy of Sciences; Proceedings of the National Academy of Sciences of The United States of America; 114; 8; 2-2017; E1326-E1335
dc.identifier.issn
0027-8424
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/65204
dc.description.abstract
The Trypanosoma cruzi ascorbate peroxidase is, by sequence analysis, a hybrid type A member of class I heme peroxidases [TcAPx-cytochrome c peroxidase (CcP)], suggesting both ascorbate (Asc) and cytochrome c (Cc) peroxidase activity. Here, we show that the enzyme reacts fast with H2O2 (k = 2.9 × 107 M-1·s-1) and catalytically decomposes H2O2 using Cc as the reducing substrate with higher efficiency than Asc (kcat/Km = 2.1 × 105 versus 3.5 × 104 M-1·s-1, respectively). Visible-absorption spectra of purified recombinant TcAPx-CcP after H2O2 reaction denote the formation of a compound I-like product, characteristic of the generation of a tryptophanyl radical-cation (Trp233•+). Mutation of Trp233 to phenylalanine (W233F) completely abolishes the Cc-dependent peroxidase activity. In addition to Trp233•+, a Cys222-derived radical was identified by electron paramagnetic resonance spin trapping, immunospin trapping, and MS analysis after equimolar H2O2 addition, supporting an alternative electron transfer (ET) pathway from the heme. Molecular dynamics studies revealed that ET between Trp233 and Cys222 is possible and likely to participate in the catalytic cycle. Recognizing the ability of TcAPx-CcP to use alternative reducing substrates, we searched for its subcellular localization in the infective parasite stages (intracellular amastigotes and extracellular trypomastigotes). TcAPx-CcP was found closely associated with mitochondrial membranes and, most interestingly, with the outer leaflet of the plasma membrane, suggesting a role at the host-parasite interface. TcAPx-CcP overexpressers were significantly more infective to macrophages and cardiomyocytes, as well as in the mouse model of Chagas disease, supporting the involvement of TcAPx-CcP in pathogen virulence as part of the parasite antioxidant armamentarium.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
National Academy of Sciences
dc.rights
info:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
Heme Peroxidase
dc.subject
Kinetics
dc.subject
Oxidants
dc.subject
Trypanosoma Cruzi
dc.subject
Virulence
dc.subject.classification
Otras Ciencias Químicas
dc.subject.classification
Ciencias Químicas
dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
dc.title
Kinetics, subcellular localization, and contribution to parasite virulence of a Trypanosoma cruzi hybrid type A heme peroxidase (TcAPx-CcP)
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2018-10-23T18:24:55Z
dc.journal.volume
114
dc.journal.number
8
dc.journal.pagination
E1326-E1335
dc.journal.pais
Estados Unidos
dc.journal.ciudad
Washington
dc.description.fil
Fil: Hugo, Martín. Universidad de la República; Uruguay
dc.description.fil
Fil: Martínez, Alejandra. Universidad de la República; Uruguay
dc.description.fil
Fil: Trujillo, Madia. Universidad de la República; Uruguay
dc.description.fil
Fil: Estrada, Damián. Universidad de la República; Uruguay
dc.description.fil
Fil: Mastrogiovanni, Mauricio. Universidad de la República; Uruguay
dc.description.fil
Fil: Linares, Edlaine. Universidade de Sao Paulo; Brasil
dc.description.fil
Fil: Augusto, Ohara. Universidade de Sao Paulo; Brasil
dc.description.fil
Fil: Issoglio, Federico Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Inorgánica, Analítica y Química Física; Argentina
dc.description.fil
Fil: Zeida Camacho, Ari Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Inorgánica, Analítica y Química Física; Argentina
dc.description.fil
Fil: Estrin, Dario Ariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Inorgánica, Analítica y Química Física; Argentina
dc.description.fil
Fil: Heijnen, Harry F. G.. University Medical Center; Países Bajos
dc.description.fil
Fil: Piacenza, Lucía. Universidad de la República; Uruguay
dc.description.fil
Fil: Radi, Rafael. Universidad de la República; Uruguay
dc.journal.title
Proceedings of the National Academy of Sciences of The United States of America
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/https://dx.doi.org/10.1073/pnas.1618611114
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/http://www.pnas.org/content/114/8/E1326
Archivos asociados