Perfilado enzimático en hongos de Las Yungas Tucumanas para el desarrollo de bionematicidas

Abstract

La región fitogeográfica de Las Yungas es una selva húmeda que se extiende desde Venezuela hasta las laderas orientales de las Sierras Subandinas de Argentina, incluyendo Tucumán. Es uno de los ambientes con mayor biodiversidad del país y uno de los ecosistemas más amenazados del mundo. Constituye un acervo biológico con recursos genéticos irreemplazables y desempeña un rol ecológico crucial. La Selva Pedemontana de las Yungas tucumanas (400–700 m s.n.m.) representa un reservorio subexplorado de hongos filamentosos con capacidad de producir metabolitos bioactivos de interés biotecnológico, permitiendo aislar, cultivar, conservar e identificar especies fúngicas nativas para avanzar en el conocimiento de su micodiversidad. Por otro lado, los nematodos son invertebrados que incluyen numerosas especies parásitas que afectan seriamente la producción agropecuaria. En Argentina, provocan importantes pér- didas tanto en ganadería (especialmente nematodos gastrointestinales de bovinos y ovinos) como en cultivos de alto valor como ser soja, tomate y papa. El control químico convencional con nematicidas posee efectos ambientales adversos y ha generado fenómenos de resistencia. Así, en el marco de un enfoque de bioprospección fúngica para el desarrollo de nematicidas ecoamigables, este trabajo abarcó un cribado preliminar de actividades enzimáticas hidrolíticas potencialmente relevantes para la acción nematicida. Para ello, se colectaron muestras de macrohongos, agua, suelo, pates de plantas, materia orgánica en descomposición e insectos, obtenidas en la Selva Pedemontana. Los aislamientos se realizaron en medio MYSA con antibióticos (ATBs, tetraciclina y cloranfenicol), y posteriormente los morfotipos únicos seleccionados, en estado puro, fueron repicados en medio MYSA sin ATBs, incubándolos a 28-30°C durante 7 días. Las actividades enzimáticas se evaluaron en medio MYSA 10%-C agar suplementado con sus- tratos específicos para el revelado de cada actividad de interés: i.e. leche descremada en polvo 3% p/v (proteasas), carboximetilcelulosa, CMC 0.5% p/v (celulasas), quitina coloidal 0.2% p/v (quitinasas), aceite de oliva 3% v/v - rodamina B (lipasas) y yema de huevo 8% p/v (fosfolipasas). La actividad se valoró de forma semicuantitativa en base a los halos de clarificación (proteasa, CMCasa, quitinasa), precipitación (fosfolipasa) o zonas coloreadas/fluo, ya sea de forma directa post-crecimiento o mediante la aplicación de reveladores específicos (ej. rojo Congo para CMCasa, luz UV para lipasa). De 145 aislamientos analizados, un porcentaje significativo (~90%) presentó actividad positiva para al menos una de las enzimas evaluadas, destacándose algunos aislamientos con perfiles multienzimáticos. Las actividades de mayor prevalencia fueron CMCasa, fosfolipasa y proteasa, seguidas por valores intermedios de lipasa, y quitinasa de forma minoritaria. Los aislamientos pre-seleccionados luego serán sometidos a tests di- rectos frente a Panagrellus redivivus, para evaluar actividad nematicida. Los perfiles muestran concordancia con el hecho de la enorme biodiversidad con la que deben competir estos hongos por alimento, o para garantizar su supervivencia, siendo capaces de producir compuestos y actividades que les permitan enfrentar a sus competidores o predadores. Este estudio respalda la utilidad del cribado enzimático como herramienta preliminar para la búsqueda de hongos nematicidas, reforzando la importancia de explorar y preservar la micodiversidad nativa como importante fuente de bioinsumos.