Estudio de Supervivencia de Streptococcus mutans en un Tipo de Fómite

Abstract

Objetivo: Evaluar la supervivencia de Streptococcus mutans (S.mutans) en un tipo de fómite. Método: Se reactivó una cepa de S.mutans ATCC 25175 criopreservada en agar TYCSB. El inóculo se estandarizó en PBS buffer hasta obtener turbidez equivalente al 0,5 de Mc Farland y un OD = 0.01 por espectrofotometría. Bloques plásticos de 2cm2/superficie fueron seleccionados como fómites. La descontaminación de los bloques se realizó por inmersión en alcohol etílico 70% v/v durante 10 minutos, los que fueron secados en cabina de seguridad biológica. La contaminación de los mismos se realizó por inmersión en inóculo estandarizado durante 10 minutos. Los bloques contaminados se extrajeron y depositaron sobre placas de Petri estériles hasta cumplir los tiempos propuestos (T0-T4 con intervalos de 30 minutos). A cada tiempo, los bloques fueron eluidos en 20 ml de buffer PBS y agitados en vortex durante 30 segundos. 100 µl de cada eluato fueron sembrados por dispersión en agar TYCSB e incubados en anaerobiosis por 48 horas a 37°C. El recuento de colonias (UFC/ml) se realizó bajo lupa estereoscópica 50X. Resultados: El recuento inicial de S.mutans fue de 7,8 X 106 (DS+1,7 X 106) UFC/ml y para cada tiempo de estudio fue de: T0=3.25 X 104 (DS+1.9 X 103); T1=2.63X104 (DS+4,50E+03); T2= 1.85 X 104 (DS+9,45E+02); T3=1.93 X103(DS+1,29E+03) y T4=1.2X103 (DS+7,21x102). Conclusión: En los rangos de tiempos establecidos, la cepa de S.mutans ensayada permaneció viable sobre la superficie plástica.

Aim: To evaluate the survival time of Streptococcus mutans (S.mutans) in a type of fomites. Method: A strain of cryopreserved S.mutans ATCC 25175 was reactivated in TYCSB agar. The inoculum was standardized in the PBS buffer to obtain turbidity equivalent to 0.5 Mc Farland and OD = 0.01 by spectrophotometry. Plastic blocks of 2 cm2 /surface were selected as fomites. Decontamination of the blocks was carried out for 10 minutes by immersion in ethyl alcohol 70% v/v, which were dried in a biosafety chamber. Contamination was carried out by immersion in standardized inoculum for 10 minutes. The contaminated blocks were extracted and put on sterile Petri dishes until the proposed times were met (T0-T4 at 30-minute intervals). At each time, the blocks were eluted in 20 ml of PBS buffer and vortexed for 30 seconds. 100 μl of each eluate were dispersed on TYCSB agar and incubated anaerobically for 48 hours at 37°C. Colony count (CFU/ml) was performed under a 50X stereoscopic magnifying glass. Results: The initial S.mutans count was 7,8 X 106 (DS+1,7 X 106) CFU/ml and for each study time was: T0=3.25 X 104 (DS+1.9 X 103); T1=2.63X104 (DS+4,50E+03); T2= 1.85 X 104 (DS+9,45E+02); T3=1.93 X103(DS+1,29E+03) y T4=1.2X103 (DS+7,21x102). Conclusion: Within the established time ranges, the tested S.mutans strain remained viable on the plastic surface.