Técnica in vitro para determinar efecto antihelmíntico de extractos de plantas sobre larvas infectantes de nematodos gastrointestinales de bovinos

Abstract

Varias técnicas in vitro han sido desarrolladas para evaluar el potencial efecto antiparasitario de compuestos sintetizados químicamente y para identificar cepas de nematodos resistentes a antihelmínticos. El ensayo in vitro de inhibición de la migración con larvas infectantes (L3) ha sido ampliamente usado para estudiar la eficacia antiparasitaria de metabolitos secundarios de las plantas (MSP). El objetivo del presente trabajo fue adaptar el ensayo in vitro de inhibición de la migración larval (IML) desarrollado por Rabel et al., (1994) al estudio de la eficacia antihelmíntica de extractos de 15 plantas autóctonas de Australia con potenciales propiedades antiparasitarias en la migración de L3 sensibles de Haemonchus placei y Cooperia sp. El polvo de cada uno de los extractos vegetales fue disuelto en buffer fosfato (0,1M fosfato; 0,05M NaCl; pH 7,2), diluidos a concentraciones de 5, 15 y 30 mg/ml y sus efectos en la motilidad de las L3 fueron evaluados. El porcentaje de migración larval fue analizado mediante un ANOVA con un arreglo factorial de especie de planta por concentración (SAS, 2004). Se realizaron comparaciones múltiples con la media más pequeña (CMM), detectándose subconjuntos con las mejores combinaciones planta-concentración dentro de cada una de las concentraciones evaluadas. La metodología empleada, nos permitió detectar interacción significativa entre los extractos de plantas y las concentraciones en cada uno de los géneros parasitarios evaluados (P ≤ 0,0001). La fácil realización del ensayo, la posibilidad de analizar un gran número de muestras y el bajo costo asociado hace que esta metodología pueda ser elegida para determinar la actividad antiparasitaria de componentes de plantas o extractos cuando se pretende explorar su potencial actividad antihelmíntica. Los resultados de la prueba in vitro sugieren la existencia de propiedades antihelmínticas asociadas con algunas de las especies de plantas evaluadas en nematodos gastrointestinales de bovinos.