Efecto del factor de necrosis tumoral alfa sobre la apoptosis de células epiteliales mamarias bovinas infectadas y no infectadas con el virus de la leucemia bovina

Abstract

El virus de la leucosis bovina (BLV) es un retrovirus de la familia Deltaretroviridae, que afecta principalmente a bovinos de raza lechera y conduce al desarrollo de linfocitosis persistente y/o linfosarcoma en bovinos infectados. La infección con el BLV es responsable de diferentes desórdenes linfoproliferativos a nivel sistémico, favoreciendo un aumento de la proliferación e inhibiendo la apoptosis. El factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) es una citoquina proinflamatoria con acciones pleiotrópicas, involucrada en la regulación de apoptosis, proliferación celular y respuesta inmune, que juega un rol importante en la eliminación de los virus en general, y particularmente frente al BLV. En trabajos previos se demostró que las células epiteliales mamarias bovinas infectadas con el BLV (MAC-T BLV) presentan menor viabilidad y mayor expresión de ARNm de TNF-α, respecto a las no infectadas. El presente estudio fue diseñado para evaluar el papel de TNF-α en la modulación de la proliferación y apoptosis de MAC-T BLV. Las células MAC-T infectadas y no infectadas con BLV se estimularon con concentraciones de 0,1 a 30 ng/ml de TNF-α recombinante (rTNF-α) durante 24 h. La viabilidad celular, proliferación celular y apoptosis fueron determinadas mediante el ensayo colorimétrico (ensayo de MTT) y citometría de flujo (marcación con AnV/PE y 7AAD). La viabilidad celular de las MAC-T BLV fue menor con respecto a las células no infectadas a las 24 h de cultivo sin estimulo. El tratamiento de las MAC-T con concentraciones de 0,1 a 30 ng/ml de rTNF-α durante 24 h, no mostró ningún efecto significativo en MAC-T y MAC-T BLV sobre la viabilidad celular. Por otro lado, aumentaron los niveles de apoptosis temprana y tardía en las MAC-T BLV al ser estimuladas con 10 y 30 ng/ml de rTNF-α durante 24 h, con respecto a las MAC-T (p < 0.05). Los resultados obtenidos en este estudio muestran que TNF-α favorece la apoptosis en células epiteliales mamarias bovinas ante la infección con BLV. Estos hallazgos brindan nuevos conocimientos sobre las interacciones entre BLV y células epiteliales mamarias bovinas, y son de fundamental importancia para la homeostasis tisular.