La ingesta periconcepcional moderada de alcohol altera las uniones intercelulares de embriones peri-implantatorios murinos

Abstract

El consumo perigestacional de alcohol produce anomalías en la diferenciación y cavitación del blastocisto peri-implantatorio, posiblemente relacionadas con defectos en la adhesión intercelular. En hembras murinas expuestas a 10% de etanol en agua de bebida, 17 días previos a la fecundación y hasta el día 4 u 8 de gestación (HT), vs hembras controles (agua, HC), se estudió, con inmunofluorescencia (IF) simple y doble (confocal): 1) la localización, el patrón y nivel de expresión de E-cadherina y ZO-1 en blastocistos (Bl); 2) la expresión de E-cadherina en embriones en gastrulación. En los Bl de las HC, la marcación de E-cadherina fue continua en los contactos celulares del trofoectodermo mural (TM), polar (TP) y macizo celular interno (MCI), pero en los Bl de las HT fue discontinua, sinuosa y con engrosamiento en los contactos celulares. En el 40-50% de Bl de las HT, la ZO-1 se expresó en TM, TP y MCI con un patrón submembranoso débil y discontinuo pero con expresión granular perinuclear y citoplasmática. En las HT, hubo escasa co-localización de la E-cadherina con ZO-1 vs HC indicando alteración de la biogénesis de las uniones en el embrión preimplantatorio. En el ectodermo embrionario de HT, observamos menor expresión de E-cadherina que en el HC (p<0.05, Scion Image). En conclusión, la expresión anómala de E-cadherina y de ZO-1 en los Bl de HT sugiere que el debilitamiento de las uniones celulares participa en la alteración de la cavitación mientras que la pérdida de uniones adherentes (E-cadherina) en el ectodermo primitivo se relacionaría con dismorfogénesis producida por la exposición a alcohol.

Murine consumption of alcohol produces perigestational anomalies in the differentiation and cavitation of peri-implantational blastocyst possibly related to intercellular adhesion defects. In CF-1 mouse females exposed to 10 % ethanol in drinking water for 17 days prior to fertilization and up to day 4 or 8 of gestation (TF) vs control females (water, CF) it was studied, by immunofluorescence (IF) single and double (confocal): 1) the location, pattern and the level of expression of E-cadherin and ZO-1 in blastocysts (Bl), 2) the expression of E-cadherin in embryos at gastrulation. While Bl from CF presented a continuous E-cadherin pattern in the mural trophectoderm cellular contacts (MT), polar (PT) and in the inner cell mass (ICM), Bl from TF, the E-cadherin was discontinuous, sinuous and was presented with membranous accumulations. In 40-50% of Bl from TF, the ZO-1 was expressed in MT, PT and ICM with a sub-membrane weak and discontinuous pattern but granular perinuclear and cytoplasmic expression. In TF, there was little co-localization between E- cadherin and ZO-1 vs CF, indicating impaired biogenesis joints in the preimplantation embryo. Embryonic ectoderm from TF had reduced expression of E-cadherin vs embryo-CF (p<0.05, Scion Image). In conclusion, the abnormal expression of E-cadherin and ZO-1 in TF suggests that weakening of cell junctions is involved in the alteration of Bl-cavitation while the loss of adherens junctions (E-cadherin) in the embryonic ectoderm can be related to dysmorphogenesis after alcohol exposure.