Formación de biofilm de microorganismos marinos degradadores de hidrocarburos: Influencia del sustrato de crecimiento

Abstract

Los microorganismos (MO) degradadoresde hidrocarburos son ubicuos y responsables de los procesos de biodegradaciónde estos compuestos en una gran diversidad de ambientes. La utilización de MOde ocurrencia natural en actividades de recuperación de sitios contaminados conhidrocarburos (biorremediación) es una tecnología eficiente de tratamiento deresiduos y efluentes, y de remediación ambiental. En particular, los sistemascon MO inmovilizados en biofilms poseen altas eficiencias y mayor supervivenciaen condiciones adversas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la capacidadde formación de biofilm de MO degradadores de hidrocarburos de origen marino enfunción del sustrato de crecimiento, para evaluar el potencial de los mismospara ser utilizados en biorremediación de hidrocarburos en sistemasinmovilizados. Para ello, se estudió el crecimiento de una cepa de Pseudomonasstutzeri (RS02) y dos consorcios microbianos (EC2-GO y FORS) en placas de96 celdas con tubos cerrados de vidrio de 2 ml con 400 ul de medio mínimomarino y una única fuente de carbono. Se ensayaron como sustratos decrecimiento: glucosa, n-hexadecano, petróleo crudo, naftaleno,fenantreno, fluoreno y pireno. Se incubaron durante 20 días con agitación, y atiempo final se determinó la turbidez del medio líquido (620 nm) y la formaciónde biofilm mediante la técnica de cristal violeta (595 nm). Se clasificó laformación de biofilm en función del valor de corte del control como débil,moderada o fuerte. Los MO ensayados resultaron fuertes formadores de biofilmcuando crecieron en glucosa. El consorcio microbiano EC2-GO enriquecido engas-oil altamente intemperizado, fue capaz de formar biofilm débil o moderadosobre hidrocarburos aromáticos; y FORS presentó formación débil de biofilmsobre fenantreno, pireno y fluoreno. No se encontraron resultados positivossobre n-hexadecano y petróleo para ambos consorcios. P. stutzeri (RS02)formó biofilm sobre todos los hidrocarburos estudiados, siendo fuerte sobre n-hexadecano,moderado sobre petróleo, naftaleno y fluoreno, y débil sobre fenantreno ypireno. En este trabajo no se encontró una correlación entre los valorespositivos de aumento de la turbidez del medio líquido de los cultivos respectoa los resultados positivos de la formación de biofilm, en contraste con lo quese describe generalmente para MO que se estudian en medios ricos. Se demostróque la fuente de carbono afecta fuertemente la formación de biofilm, y que lautilización de glucosa como fuente de carbono para realizar screening para laprospección de MO formadores de biofilm, previamente aislados sobrehidrocarburos, es recomendable aunque no concluyente. Los resultados obtenidosmostraron que los MO estudiados fueron capaces de metabolizar los hidrocarburostesteados e incluso formar biofilm sobre ellos, revelando buenascaracterísticas de los mismos para su utilización en la degradación de compuestosaromáticos de mayor resistencia en sistemas inmovilizados.